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Viewn Vivo 動(dòng)物活體共聚焦成像系統(tǒng)

手持探頭式活體激光共聚焦顯微鏡

可以觀測(cè)任何探頭接觸的組織,生成實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高分辨共聚焦圖像

活體動(dòng)物層面的分辨率可高達(dá)0.55微米級(jí)別

深度可高達(dá)400μm,可進(jìn)行不同層面掃描成像并合成3D結(jié)果


詳情

產(chǎn)品原理

澳大利亞OptiScan活體共聚焦成像系統(tǒng)使用光纖的尖端作為空間濾波器,使之小型化。系統(tǒng)內(nèi)部的藍(lán)色激光(488nm)通過(guò)光纖到達(dá)一個(gè)靈活手持式的探頭。探頭中的光學(xué)裝置將激光聚焦到組織中的一個(gè)點(diǎn)上用以激發(fā)熒光。發(fā)射光(>510nm)被捕獲到光纖中,并通過(guò)濾光片進(jìn)入探測(cè)器。通過(guò)掃描整個(gè)圖像平面上的焦點(diǎn)和收集點(diǎn)強(qiáng)度的測(cè)量值來(lái)生成圖像。圖像平面還可以在樣本中上下平移,從而生成3D圖像棧。


Optiscan 原理.png


整體介紹

       澳大利亞OptiScan的Viewn Vivo是Fluorescence In Vivo Endomicroscope 2nd generation(第二代活體熒光內(nèi)鏡)的縮寫,是一類活體共聚焦顯微鏡。OptiScan ViewnVivo? (FIVE2)“動(dòng)物活體共聚焦成像系統(tǒng)”采用了手持探頭式成像方式,可以觀測(cè)任何它接觸的組織,生成高分辨率的共聚焦圖像,活體動(dòng)物層面的分辨率可高達(dá)0.55微米級(jí)別,可在活體動(dòng)物層面觀察到組織或細(xì)胞的病理切片信息,細(xì)胞或亞細(xì)胞級(jí)別的染色信息,以及抗體表達(dá)、熒光染料、納米粒子的分布情況等。


FIVE 2-3.png



產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 最小0.5微米級(jí)別分辨率,可直接觀察到活體的組織和細(xì)胞情況;

2. 深度最高可達(dá)400μm,可進(jìn)行不同層面掃描成像并合成3D結(jié)果;

3. 探頭式成像,成像角度和位置更靈活,可觀察更多切面;

4. 可進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)采集,設(shè)置幀頻采集速度并進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間采集;

5. 采用熒光成像的方式,可選用多種商業(yè)化的熒光探針,易標(biāo)記;

6. 操作簡(jiǎn)單,無(wú)需復(fù)雜設(shè)置參數(shù), 無(wú)需專門人員負(fù)責(zé)。


為何選擇Viewn Vivo?

  1. 極佳的分辨率:使用遠(yuǎn)端單一掃描纖維而不是近端放置掃描纖維束提供無(wú)與倫比的橫向和軸向分辨率。單一纖維消除了成像盲區(qū)和斷裂纖維的問(wèn)題,提供高靈敏度和長(zhǎng)壽命。

  2. 永不錯(cuò)過(guò)您的圖像:ViewnVivo?成像軟件包括圖像回滾功能。用戶可以從最多60幀內(nèi)存中選擇和保存圖像。單個(gè)圖像或圖像選擇可以保存或制作成視頻文件。用于縱向研究。

  3. 縱向研究:高水平的消毒和滅菌方案提供了一種具有成本效益的實(shí)用方法,可以對(duì)同一主題進(jìn)行縱向研究,以及對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物和其他需要無(wú)菌的樣品進(jìn)行成像。

  4. 長(zhǎng)壽命的探頭:ViewnVivo?探頭不是消耗品,將通過(guò)長(zhǎng)期的操作和數(shù)百個(gè)程序來(lái)保持其成像質(zhì)量。

  5. Z軸的精準(zhǔn)調(diào)控:ViewnVivo?顯示微米精度的焦平面位置。成像軟件提供了一個(gè)直觀的界面來(lái)設(shè)置和收集Z軸的圖像數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)可以被制作成視頻或轉(zhuǎn)移到Fiji進(jìn)行處理。

  6. 任意角度成像:靈活的手持式探頭允許用戶對(duì)以前無(wú)法成像的樣本進(jìn)行成像。


廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域

主要的應(yīng)用領(lǐng)域:

  1. 肝臟、腎臟、大腦、腫瘤等實(shí)質(zhì)性臟器的成像及顯微觀察;

  2. 口腔、呼吸道、胃腸道等腔道成像及顯微觀察;

  3. 活體動(dòng)物層面觀察組織或細(xì)胞的病理切片信息;

  4. 細(xì)胞的染色信息及抗體表達(dá)情況;

  5. 熒光染料、納米粒子的分布示蹤;

  6. 血管微循環(huán)信息。


  • 腫瘤學(xué)研究:

腫瘤發(fā)生和凋亡、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤偵測(cè)和診斷、腫瘤邊界探測(cè)等;

  • 組織再生研究:

干細(xì)胞研究、組織工程學(xué)、組織免疫、類器官等;

  • 細(xì)胞追蹤應(yīng)用:

干細(xì)胞研究;炎癥反應(yīng);細(xì)胞間或細(xì)胞與組織的相互作用等;

  • 光動(dòng)力學(xué)治療應(yīng)用:

光敏劑的分布;光動(dòng)力學(xué)反應(yīng);損傷檢測(cè)和識(shí)別等;

  • 感染和治療研究:

組織微生物和殺菌劑反應(yīng)等;

  • 藥物研究:

藥代動(dòng)力學(xué)、組織的藥物反應(yīng)等;

  • 病理學(xué)研究:

急性肺損傷模型、肝病模型、疾病所致組織形態(tài)學(xué)變化等;

  • 微血管研究:

微血管動(dòng)力學(xué)和結(jié)構(gòu)、血管新生或抗血管生成、血栓形成等;

  • 動(dòng)物模型研究:

組織損傷或疾病研究等;

  • 分子成像應(yīng)用:

受體標(biāo)簽;蛋白表達(dá)分析;轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(如GFP/YFP)等;

  • 運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)疾病研究:

韌帶和肌腱纖維結(jié)構(gòu)成像等。

 


應(yīng)用展示

1、口腔癌OptiScan成像

左:正常組;中:癌前期組;右:癌變組。

注:Optiscan技術(shù)可以實(shí)時(shí)捕捉口腔黏膜的亞細(xì)胞細(xì)節(jié),而無(wú)需進(jìn)行活組織檢查。Scale bar=100μm。


1. 口腔癌.jpg

2、宮頸癌OptiScan成像

左:正常鱗狀上皮;右:宮頸上皮肉瘤變。

注:0.05%吖啶黃溶液外用。Scale bar=100μm。


3. 宮頸癌.jpg


3、腫瘤血管生成OptiScan成像

左:正常皮膚微脈管系統(tǒng);右:黑色素瘤影響的皮膚微脈管系統(tǒng)。

注:活體CLE成像顯示無(wú)胸腺小鼠植入黑素瘤內(nèi)及周圍的黑素瘤相關(guān)脈管系統(tǒng)發(fā)生變化,靜脈注射(0.3 ml, 10 mg / ml)fitc-葡聚糖作為造影劑。Scale bar=100μm。


6. 腫瘤血管生成.jpg


4、自體熒光OptiScan成像

左:ACL中有序的膠原纖維;右:ACL中過(guò)度負(fù)荷后的無(wú)序膠原纖維。

注:前交叉韌帶(ACL)的自體熒光成像。本研究著眼于疲勞相關(guān)微損傷導(dǎo)致的前交叉韌帶失效。Scale bar=100μm。


7. 自體熒光成像.jpg


5、肺內(nèi)皮三重標(biāo)記OptiScan成像

造影劑:

肺內(nèi)皮細(xì)胞核:吖啶橙,0.05%靜脈注射(單箭頭);

血漿:熒光素葡聚糖70kDa,靜脈注射(雙箭頭);

遠(yuǎn)端上皮膜:FITC-R。普通的植物血凝素。(三箭頭)。Scale bar=100μm。


9. 肺內(nèi)皮三重標(biāo)記.jpg


6、胃腸道微生物OptiScan成像

注:0.05%吖啶黃染色犬細(xì)胞胃內(nèi)幽門螺桿菌。可觀察到活的微生物。


11. 胃腸道微生物成像.jpg


7、斑馬魚眼部血管OptiScan成像

左:成像深度:250 μm,表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像;

右:最明亮的一張;Scale bar=100μm。



左:成像深度:180μm,表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像,吖啶黃用作背景造影;

右:最明亮的一張,在Image J里深度顏色編碼。Scale bar=100μm。



8、腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤OptiScan成像

注:活大鼠腦中被滲漏血管包圍的腫瘤病灶。該腫瘤為惡性膠質(zhì)瘤,浸潤(rùn)性強(qiáng),可引起出血。這里使用的造影劑是靜脈注射熒光素。在本實(shí)驗(yàn)中,注射了IV熒光素。它分布在整個(gè)動(dòng)物周圍,可以看到血液通過(guò)血管流動(dòng)。為此,頭骨需要被打開或變薄。大型動(dòng)物的硬腦膜也需要手術(shù)打開。Scale bar=100μm。



Video

左:成像深度:400 μm ,z軸: 每4 μm 成像一張; 右:最明亮的一張; 注:膠原凝膠Alexa 488 Phallodidin中的人真皮成纖維細(xì)胞(細(xì)胞骨架的f -肌動(dòng)蛋白染色)。Scale bar=100μm。
左:成像深度:250 μm,表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像; 右:最明亮的一張;Scale bar=100μm。
左:成像深度:180μm,表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像,吖啶黃用作背景造影; 右:最明亮的一張,在Image J里深度顏色編碼。Scale bar=100μm。
注:活大鼠腦中被滲漏血管包圍的腫瘤病灶。該腫瘤為惡性膠質(zhì)瘤,浸潤(rùn)性強(qiáng),可引起出血。這里使用的造影劑是靜脈注射熒光素。在本實(shí)驗(yàn)中,注射了IV熒光素。它分布在整個(gè)動(dòng)物周圍,可以看到血液通過(guò)血管流動(dòng)。為此,頭骨需要被打開或變薄。大型動(dòng)物的硬腦膜也需要手術(shù)打開。Scale bar=100μm。
用鈣敏感染色Fluo-8對(duì)小鼠腸道進(jìn)行活體鈣成像。神經(jīng)刺激后離體小鼠腸壁鈣水平的變化。Scale bar=100μm。

組織培養(yǎng)成像視頻

斑馬魚眼部血管成像視頻-1

斑馬魚眼部血管成像視頻-2

腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤成像視頻

鈣成像視頻

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